Receptores a estradiol y progesterona para la elección de la terapia endocrina en pacientes con mastopatía fibroquística / Estradiol and progesterone receptors to elect endocrine therapy in patients with fibrocytic mastopathy

Se estudió el contenido de receptores a estradiol y progesterona en el tejido mamario de pacientes con mastopatía fíbroquística (MFQ). Se formaron 4 grupos diferentes de acuerdo al tipo de receptor que se encontró: (R-E+, R-Pg+); (R-E+, R-Pg-); (R-E-, R-Pg-).El 7 por ciento de las MQF fueron positivos para ambos receptores, mientras que el 75 por ciento fueron negativos tanto para el receptor a estraqdiol como para el de progesterona. El 10 por ciento presentan el (R-E+) y el 80 por ciento fueron (R-Pg+). El número de unión específica encontrada en este tipo de patología considerados "Receptor positivo" de este estudio, estuvieron en el rango de 6.1-80 fmol/mg. de proteína. receptor negativo se consideró cuando la unión específica fue menos de 6 fmol/mg. de proteínas. No se encontró correlación significativa entre la concentración de estos receptores y la edad de la paciente. Con los datos así obtenidos, se discute la presencia y tipo de estos receptores como criterio para ampliar el campo de acción para la elección de la teraía endócrina en este tipo de enfermedad benigna de la mama.

Colesterol y fosfolípidos en el plasma seminal humano antes y después de vasectomía / Cholesterol and phospholipids in seminal plasma before and after vasectomy

Antes y a los 2 y 6 meses después de practicada la vasectomía se evaluaron las alteraciones que pudieran presentar las glándulas del aparato genital masculino en su fisiología y capacidad secretora, mediante el análisis químico de los constituyentes del plasma seminal (colesterol libre, colesterol esterificado y fosfolípidos). El resultado de este análisis químico, indica que la relación de la concentración del colesterol libre con respecto al colesterol esterificado, permanece constante a los seis meses de practicada la vasectomía, no así la concentración de fosfolípidos, la cual disminuye a partir de los dos meses de realizado este procedimiento quirúrgico. Estos hallazgos indican de una manera indirecta las alteraciones en la capacidad secretora que pudieran tener las glándulas genitales debido a este método de anticoncepción masculina.

Papel de la hiperpolarización y despolarización en la membrana del espermatozoide humano / The role of hyperpolarization and despolarization on human spermatozoon membarane

El potencial eléctrico a través de la membrana (gama) se cuantificó mediante la acumulación del catión radiactivo trifenilmetilfosfonio (TPMP+) en la membrana espermática. Los espermatozoides previamente lavados se incubaron en presencia de TPMP+ en un medio denominado K+ - baja o K+ - elevada hasta que se logra el estado de equilibrio (20 min a 37 grados centigrados)., El valor obtenido por diferencia se inserta en la ecuación de Nernst y se obtiene el valor de -69 + - 2 mV. La presencia de cationes como el Zn ++ y Mg++ en el medio de incubación inducen una hiperpolarización de un 10 y 8.6% respectivamente. La adición de reactivos específicos como el p-cloromercuribenzoato-ácido sulofónico y etilendiaminotetra-acetato sódico, disminuye el gama en un 35 y 58% respectivamente. Los agentes que actúan sobre los componentes de la superficie de espermatozoide como el ditiotreitol y progesterona inducen una hiperpolarización y despolarización de la membrana en un 16 y 40%, respectivamente. La presencia de propanolol y L-alfa-lisofosfatidilcolina, los cuales afectan los gradientes iónicos presentes a través de la membrana inducen una despolarización en un 43 y 92%, respectivamente. Finalmente, la adición de tetraffenilboron (TPB -) en el medio de incubación aumentó el valor del gama 75%. La importancia de estos estudios es que mediante la utilización de agentes hiperpolarizantes y despolarizantes se obtienen cambios en el gama desde -80 + - 2.5 mV hasta -6 + - 0.6 mV es decir, cambios hasta de 74 +- 1.5 mV a través de la membrana espermática.(au)

Actividad de sialiltransferasa en la membrana espermática y su relación con fertilidad y esterilidad humanas / Sialyltransferase activity on spermatic membrane and its relationship with human fertility and sterility

La actividad de la sialiltransferasa (ST) fue determinada en los espermatozoides (spz) de sujetos normospérmicos (>80 X 10 6 spz/ml y mn[as del 75% de movilidad) y en los spz de pacientes con problemas de fecundidad (oligospérmicos < 20 y 10 6 spz/ml y menos del 20% de movilidad y astenospérmicos > 40 X 10 6 spz/ml y menos del 10% de movilidad). La actividad de la ST se cuantifica mediante la transferencia de radiactividad de CMP -3 H- siálico hacia el aceptor exógeno (fetuina desializada). El complejo enzima sustrato formado, al ser colocado en presencia del ácido fosfotúrgstico da un producto de fosfotungstato insoluble, el cual es retenido en un filtro de fibra de vidrio. La actividad enzimática disminuye en los spz de oligospérmicos en un 62 + - 5% con respecto a los spz de normospérmicos. La disminución de la actividad de la ST en los spz de pacientes infértiles permite suponer que esta enzima participa probablemente como causa directa de su patología y que su disminución obedece a un daño en la integridad estructural de la membrana espermática.(au)

Perfil potencial de membrana en el espermatozoide de mamífero durante la maduración, eyaculación y capacitación / Membrane potential profile in mamalian spermatozoa during maduration, ejaculation and capacitation

El potencial eléctrico a través de la membrana (U) se cuantificó mediante la acumulación del catión lípido-soluble radiactivo trifenilmetilfosfonio (TPMP+) en la membrana del espermatozoide. Los espermatozoides de mamíferos previamente lavados se incubaron en presencia de TPMP+ en un medio denominado K+ = baja o K+ - elevada hasta que se logra el estado de equilibrio (20 min a 37 grados centrígrados). La diferencia obtenida entre los medios de incubación, se trnsformó a valores de concentración conforme a la cantidad de TPMP+ acumulada en el volumen intracelular del espermatozoide, al ser insertados estos valores en la ecuación del Nernst se obtiene el U. Durante el proceso de maduración el U obtenido en los espermatozoides de mamífero de la región de la cabeza del epididímo fue de -75+ - mV, en los espermatozoides de la región del cuerpo y de la cola, el U obtenido fue de -60+ -5 y -52 + -3.5mV, respectivamente. En el espermatozoide eyaculado el U así obtenido es de -69 + -2 mV. Durante la capacitación, al incubar los espermatozoides de mamíferos en presencia de iones de Ca++ y el ionóforo A 23187 el U así obtenido es de -35 + - mV. Estos cambios en el U, son significativos ya que indican que cuando el espermatozoide se encuentra en estas condiciones fisiológicas se modifica la polaridad de la membrana a juzgar por la hiperpolatización y/o despolarización observada.

Papel de la sialiltransferasa y neuramidasa en el epidídimo de la rata / Role sialyl-transferase and neuraminidase in the rat's epididymis

La sialilación y desialización en el epidídimo de rata es la transferencia o remoción del ácido siálico, hacia o de, un aceptor adecuado (glico o sialoglicoproteína). La sialilación de las glicoproteínas o glicolípidos es cuantificada mediante la actividad de sialiltransferasa, los homogenados de la región de la cabeza mostraron 14 veces más elevada la actividad de sialiltransferasa que los homogenados de cola del epidídimo. La desialización de las sialoglicoproteínas es determinada por la actividad de neuraminidasa, pudiéndose observar que el homogenado de la región de la cabeza presenta casi tres veces mayor actividad que le homogenado de la cola del epidídimo. Al relacionar las actividades de sialiltransferasa/neuraminidasa de la regíon de la cabeza y cola, los valores obtenidos fueron de 0.19 ñ 0.03 y 0.04 ñ 0.005 respectivamente. Cuando se relacionan las actividades de neuraminidasa/sialiltransferasa de la región de la cabeza y de la cola del epidídimo, los valores obtenidos fueron de 5ñ0.6 y de 25ñ3.3 respectivamente. Los resultados proveen evidencias convincentes de que la sialilación en la región de la cabeza es más activa que la obtenida en la región de la cola. Por otro lado, al valorar la desialización se observa que ésta es más efectiva en la región de la cola del epidídimo de la rata

Sitios de unión tipo I y II a estradiol en endometrio durante la implantación del blastocisto / Binding sites types I and II to stradiol in endometrium during blastocyst implantation

Hemos analizado las propiedades de los sitios de unión a 17-ß-esradiol, del tipo y libres y unidos del tipo II, en el citosol de endometrio de rata, en el día cinco de embarazo; las muestras corrsponden a endometrio receptivo al blastocisto (ER), endometrio no receptivo (ENR) y a endometrio de cuerno uterino ovariectomizado (EOv) de las mimas ratas embarazadas. El sitio de unión tipo II, ocupado por el esteroide, fue cuantificado por análisis de intercambio (incubado a 25-C durante 12 h). La constante de discociación obtenida al incubar a 4 o 25-C son semejantes para cad uno de los sitios de unión en las tres muestras de endodmetrio; la capacidad de unión (fentomoles/mg de proteínas) de los sitios de unión tipo I y tipo II y la relación entre sitios ocupados y no ocupados de tipo II por estadiol endógeno, parece ser característico para cada uno de los tres endometrios analizados

Contribución al potencial de membrana de la ATPasa Na+-K+ en el espermatozoide humanos / Contribution of ATPasa Na+-K+ to membrane potential in human spermatozoa

En diferentes estirpes celulares el transporte de cationes y anones monovalentes y la regulación de numerosos procesos biológicos de la superficie celular, están asociados con el potencial eléctrico a través de la membrana eletrostatica. En el espermatozoide humano la ATPasaNa+-K+ está involucrada en el transporte de Na+ y K+, y la actividad electrogénica de esta enzina se ve afectada considerablemente cuando es sometida a la acción de la ouabaína. El membrana eletrostática se cuantificó mediante la acumulación del catión lípidosoluble radiactivo, trifenilmetilfosfonio (TMMP+) en la membrana del espermatozoide. Los espermatozoides previamente lavados se incubaron en presencia de TPMP+ en un medio denominado low-K+ o high-K+, hasta que se logra el estado de equilibrio (20 min a 37-C). El membrana eletrostatica así obtenido es de -69 ñ 2mV, este membrana eletrostatico es temperatura-dependiente. Cuando predomina la concentración de Na+ en el méo de incubación, la acumulación de TPMP+ en la membrana del espermatozoide se ve incrementada. Ahora bien, cuando se aumenta la concentración de K+, la acumulación de TPMP+ disminuye hasta en 70% aproximadamente. La adición de paracloromercuribenzoato-ácido sulfónico, un inhibidor de los grupos sulfidrilo,, induce despolarización de la membrana espermática hasta en un 35%. En presencia de ouabaína, un inhibidor de la ATPasa Na+ -K+ se obtienen cambios hasta de -20mV. estos datos sugieren que la ATPasa Na+ -K+ desempeña una función importante en la regulación del membrana eletrostatica

Sialoproteínas en la interación blastocisto-endometrio en rata / Sialyproteins in blastocyst-endometrium interaction in rats

El homogenizado de rata, en la etapa de preimplatanción, es capaz de transferir residuos sialil desde citidina monofosfato-3H-siálico (CMP-[3H]-siálico) hacia substratos aceptores endógenos y exógenos (desialo fetuína). La transferencia parece ser debida a la actividad de la enzima N-acetil-neuraminil transferasa E.C. 2.4.99; esta actividad es mayor en el endometrio receptivo para el blastocisto (ER) 0.75 ñ 0.15 nmoles/h/mg de proteína, que en el endometrio no receptivo (ENR)0.40 ñ 0.14 nmoles/h/mg de proteína. La incorporación de [3H]-siálico hacia desialo fetuína es un poco mayor del 60%. Los productos de la reacción enzimática fueron sometidos a condiciones reductoras y analizadas por electroforesis en un gradiente lineal de poliacrilamida, 5 a 22% y cuantificada la radiactividad a lo alrgo del gel. La mayor radiactividad entre ER y ENR es cualitativamente semejante. Los productos de reacción tratados con neuraminidasa liberan casi el 60% del [3H]-siálico incorporado

Efecto de las hormonas esteroidales sobre el potencial de membrana en el espermatozoide humano / Effect of steroid hormones on the membrane potential in human spermatozoa

Mediante la acumulación de un cation lipofílico radiactivo Trinilmerilfosfonio (TPMP+) es cuantificado el potencial electrostático a través de la membrana (potencial de membrana) en el espermatozoide humano eyaculado. Los espermatozóides lavados fueron resuspendidos e incubados en los medios low-K+ y high-K+, hasta que se logra el estado de equilibrio (20 min a 37-C), el volumen intracelular fue determinado y transformado a valores de concentración, y al insertar estos valores en la ecuación de Nernst se obtiene el potencial de membrana. cuando la concentración de K+ es baja en el medio de incubación el potencial de membrana es de 69 ñ 2mV, este potencial de membrana es temperatura y pH dependiente. Ahora bien cuando los espermatozoides se incubaron en las mismas condiciones, en presencia de testosterona, estradiol y progesterona, la adición de estas hormonas en el medio de incubación provocó la disminución del potencial de membrana en un 29.32 y 40% respectivamente. Por otro lado, al capacitar los espermatozoides en presencia de los iones Ca++ y el ionoforo A23187 el potencial de membrana así obtenido disminuye hasta en un 50%. Por lo tanto, las hormonas esteroidales actúan sobre la membrana del espermatozoide modificando su organización estructural, provocando una disminución en el potencial de membrana, este efecto puede ser importante durante la capacitación y en la preparación de la penetración del espermatozoide hacia el óvulo

Determinación del potencial de membrana en el espermatozoide humano eyaculado / Membrana potential determination in human eyaculated spermatozoa

La acumulación del catión lipofílico radiactivo trifenilmetilfosfonio (TPMP+), en el espermatozoide es utilizado para cuantificar el potencial electrostático a través de la membrana. Los espermatozoides lavados fueron resuspendidos e incubados en un medio conteniendo la concentración de K+ baja elevada, hasta que el catíon logra el estado de equilibrio (20 minutos a 37-C). Cuando la concentración de K+ es baja en el medio de incubación el membrana es -69 ñ 2 mV, y cuando la concentración externa de K+ fue incrementada, la membrana del espermatozoide se despolariza, disminuyendo el membrana hasta en 80%. La acumulación del catión fue modificada en presencia de varios agentes, los cuales afectan a los gradientes iónicos a través de la membrana plasmática. La adición valinomicina al medio de incubación incrementa en le membrana en el espermatozoide a -82.8 ñ 2 mV; con Ca++ se logra un efecto similar. La ATPasaNa+-K+ parece jugar un papel importante en el membrana del espermatozoide. En presencia de ouabaina un inhibidor de la ATPasa Na+-K+ disminuye el membrana en un 40%. Por otro lado, al inhibir la ATPasa mitoconfrial, por el desacoplante de la fosforilación oxidativa 2, 4 dinitrofenol, el membrana disminuye hasta en 50%. Por último, la acumulación de TPMP+ es tiempo, temperatura, pH y sustrato-dependiente, y es linear en relación al número de espermatozoides

Cambios del potencial de membrana en el espermatozoide de conejo durante la maduración epidimaria / Membrane potential changes in rabbit spermatozoa during epididymal maturation

El potencial electrostático a través de la membrana se cuantificó mediante la acumulación del catión lipofilico radiactivo, trifenilmetifosfonio (TPMP+) en el interior de la membrana de los espermatozoides de eyculado y en los obtenidos de cabeza, cuerpo y cola del epidídimo de conejo de la raza Nueva Zelanda. Los espermatozoides lavados de cabeza, cuerpo y copa, se incubaron a 37-C, durante 20 minutos en los medios low-K+ y highK+. El potencial electrostático así obtenido disminuye en los espermatozoides de la región del cuerpo en un 20% y en los de cola en un 30% con respecto a los espermatozoides de la región de la cabeza. Por otro lado, cuando los espermatozoides de la cabeza, cuerpo y cola se incubaron en presencia de glucosa el potencial electrostático aumentó en un 15,29 y 50% respectivamente. Los resultados indican que el potencial electrostático disminuye conforme los espermatozoides avanzan a través del epidídimo y éste es sulfato-dependiente

Cuantificación de receptores de estradiol y progesterona en el cáncer de mama para la elección del tratamiento / Quantification of estradiol and progesterone receptors in breast cancer; for treatment election

Se estudiaron 75 mujeres con cáncer mamario tanto desde el punto de vista clínico, como del contenido de receptores para estadiol y progesterona en el tejido tumoral. Los datos obtenidos se correlacionaron con el tipo histológico del tumor. El 75% de las mujeres de este estudio cursaban la perimenopausia o postmenopausia con edades por arriba de los 44 años, fueron multíparas y habían amamantado a sus hijos por largos periodos. De los 75 tumores para el caso estradiol, 60% fueron receptor R-E2(-) y 40% receptor positivo R-E2(+), mientras que para el receptor de progesterona 44% fueron receptor positivo R-P4(+) y 56% receptor negativo R-P4(-). Según tipo de receptor que se encontró, se formaron 4 grupos: R-E2(-), R-P4(-); R-E2(+), R-P4(+); R-E2(-), R-P4(+) y R-E2(+), R-P4(-). El 37% de los tumores fueron negativos para ambos receptores, mientras que 21% fueron positivos, tanto para el receptor de estradiol como para el de progesterona. El diagnóstico histopatológico difenitivo sólo se obtuvo en 50 casos, los tumores más frecuentes (43 de 50) fueron el carcinoma ductal infiltrante y el adenocarcinoma de conductos sin patrón específico. De los 43 tumores de este tipo, 19 fueron receptor positivo para estradiol y 20 fueron receptor positivo para progesterona en forma independiente, y solamente 13 fueron receptor positivo para ambas hormonas. Con estos datos y con el estado actual de conocimiento en este campo, se comenta la importancia de la presencia, tipo y contenido de receptores en el tumor maligno de mama como criterios para la elección del tratamiento de los pacientes afectados

Receptores de estradiol y progesterona en el carcinoma mamario / Estradiol and progesterone receptors in mammary cancer

Se estudió el contenido de receptores para estradiol y progesterona en el tejido tumoral de 75 mujeres en cáncer de mama. Los datos obtenidos se correlacionaron con el tipo histológico del tumor. El 75 por ciento de las mujeres de este estudio cursaban la perimenopausia o postmenopausia con edades por arriba de los 44 años, 76 por ciento tenían el antecedente de 3 o más partos y habían amamantado a sus hijos por largos períodos. De los 75 tumores 60 por ciento fueron receptor negativo para estradiol R-E2(-), y 40 por ciento receptor a estradiol positivo R-E2.(+), mientras que para el receptor de progesterona 44 por ciento fueron receptor positivo R-P4(+) y 56 por ciento receptor negativo R-P4(-). Se formaron 4 grupos diferentes de tumores de acuerdo al tipo de receptor que se encontró: R-E2(-), R-P4(-); R-E2(+), R-P4(+); R-E2(-), R-P4(+) y R-E2(+) R-P4(-). El 37 por ciento de los tumores fueron negativos para ambos receptores, mientras que 21 por ciento fueron positivos tanto para el receptor de estradiol como para el de progesterona. Mediante el análisis de Scatchard se determinaron las constantes fisicoquímicas de estos receptores; para el de estradiol la constante de disociación (Kd) fue de 11.4 x 10**-11M y el número de sitios de unión (n) de 20.8 fmol/mg de proteína. Para el receptor de progesterona la Kd fue de 1.48 x 10**-9M y n, de 17.0 fmol/mg de proteína. La unión específica encontrada en los tumores considerados "receptor-positivo" de este estudio estuvieron dentro del rango de 5.1 a 231.3 fmol/mg de proteína. Receptor negativo se consideró al tumor con unión específica menor a 5 fmol/mg de proteína. El diagnóstico histopatológico definitivo solo se obtuvo en 50 casos. El tumor más frecuentemente encontrado (43 de 50) fue el carcinoma ductal infiltrante sin patrón específico. De los 43 tumores de este tipo 19 fueron receptor positivo para estradiol y 20 fueron receptor positivo para progesterona en forma independiente, y solamente 13 fueron receptor positivo para ambas hormonas. Con estos datos y con el estado actual del conocimiento en este campo, se discute la importancia de la presencia, tipo y contenido de receptores en el tumor maligno de mama como criterios para la elección del tratamiento de las pacientes afectadas